- 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
TrypRE select(1×)是畢赤酵母（Pichia Pastoris）基因工程菌株，經(jīng)發(fā)酵培養、分離純化、配制而得到的重組熱穩定胰蛋白酶消化液。TrypRE select是一種非動(dòng)物源性重組酶，可用于解離多種貼壁哺乳動(dòng)物細胞，包括 CHO、HEK 293、A529、原代人角質(zhì)化細胞和胚胎干細胞。本品所用的重組酶是來(lái)源于尖孢鐮孢（Fusarium oxysporum）的胰蛋白酶樣蛋白酶，是一種絲氨酸蛋白酶，能選擇地水解蛋白質(zhì)中由賴(lài)氨酸或精氨酸的羧基末端所構成的肽鏈，具有重組豬胰蛋白酶、重組牛胰蛋白酶相同的酶學(xué)性質(zhì)。
TrypRE select(1×)在細胞實(shí)驗中已被證明可以有效地解離含血清和不含血清培養的貼壁細胞，具有與重組豬胰蛋白酶相似的消化特性。與重組豬胰蛋白酶等不同，TrypRE select(1×)不易自切，可在2-8℃、室溫下穩定存放，使用方便。
- 產(chǎn)品優(yōu)勢
與普通胰蛋白酶和其他解離試劑相比，TrypRE select(1×)具有以下特點(diǎn)：
? 無(wú)動(dòng)物源性：無(wú)動(dòng)物病毒、無(wú)致病物質(zhì)、無(wú)外源因子污染，安全性高。
? 在室溫下穩定：使用方便。
? 對細胞作用溫和：細胞毒性小，可保持細胞健康。
? 合規性：生產(chǎn)設備和生產(chǎn)環(huán)境符合相關(guān)法規要求，符合 GMP 指導原則。
? 質(zhì)量文件完整：按客戶(hù)需求，可提供相關(guān)法規支持文件。
- 產(chǎn)品特性
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項目 |
特性 |
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來(lái)源 |
尖孢鐮孢 |
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表達系統 |
畢赤酵母 |
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性狀 |
單一主條帶（SDS-PAGE） |
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酶活性 |
≥200 USP units/ml |
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滲透壓 |
280-300mOsm/kg |
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pH |
7.0-7.4 |
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內毒素 |
≤1.0EU/ml |
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無(wú)菌檢測 |
陰性 |
酶活定義： 25℃，pH7.6，反應體系3.0ml (1cm 光路)，每分鐘酶解BAEE使253nm下的吸收值增加0.003定義為一個(gè)USP單位。
- 推薦使用方法
1）使用前將TrypRE select(1×)和完全生長(cháng)培養基預熱至37℃。最大限度地減少停留時(shí)間。
2）吸出并丟棄用過(guò)的培養基。
3）用5ml不含鈣和鎂的DPBS緩沖液清洗細胞。吸出并丟棄。
4）加入適量體積TrypRE select(1×)到培養瓶（如5ml到75ml培養瓶），確保TrypRE select(1×)完全覆蓋細胞。
5）在37℃下孵育，直至細胞脫落。使用倒置顯微鏡觀(guān)察細胞，以確保細胞從培養瓶表面完全脫落。如有必要，輕輕敲擊培養瓶以去除細胞。
6）加入5-10ml預熱的完全培養基到培養瓶。傾斜培養瓶直到徹底沖洗培養瓶。將細胞懸液轉移至15ml錐形管中。
7）100×g離心5-10min。
8）丟棄上清液，并用2-5ml預熱的完全培養基重懸細胞沉淀。
9）使用自動(dòng)細胞計數器確定活細胞密度和存活率。
10）根據您的細胞類(lèi)型，根據正常方案接種、孵育和繼代培養。
- 產(chǎn)品用途
用各種類(lèi)型的細胞消化，如貼壁細胞的傳代消化；組織塊消化與原代細胞獲取；微載體培養細胞的消化；干細胞的消化；免疫細胞消化等。
- 運輸和儲存穩定性
運輸穩定性：冰袋保溫運輸，活性穩定。
儲存穩定性：儲存穩定性：在2-8℃、密封、避光條件下可保存24個(gè)月，也可在-15℃及以下、密封、避光條件下保存24個(gè)月。在室溫、密封、避光條件下可保存1個(gè)月。
- 注意事項和免責聲明
? 本品開(kāi)瓶后應盡快使用，保存過(guò)程中應防止微生物污染。
? 本品僅供科研生產(chǎn)使用，不得用于人體。
